Küsimus:
Kaubanduslike antikehade soovitatavad rakendused
walkytalky
2011-12-17 18:29:29 UTC
view on stackexchange narkive permalink

Konkreetsete valgu sihtmärkide jaoks mõeldud primaarsete antikehade kaubanduslikud tarnijad loetlevad tavaliselt soovitatavad rakendused, mille puhul antikeha tõenäoliselt toimib. Tavaliselt otsin neid immunofluorestsentsi jaoks ja minu mulje (mis võib tõepoolest põhineda mitteesindaval proovil) on see, et enamikku antikehi soovitatakse kasutada ainult koos Western Blottingiga.

Miks see nii on? Kas WB on kõige tavalisem rakendus? Kõige üldisem? Kas seda on lihtsam testida kui IF-l?

Ja võib-olla veelgi täpsemalt, kui tõsiselt peaks neid soovitusi võtma? Kui antikeha IF-i jaoks ei soovitata, kas see tähendab, et see tõenäoliselt ei toimi? Või et võib hästi, aga keegi ei viitsi kontrollida? Või et see peaaegu kindlasti nii läheb?

Kaks vastused:
#1
+7
nico
2011-12-18 16:18:27 UTC
view on stackexchange narkive permalink

Võib-olla on WB-d neil lihtsam testida?

Üldiselt soovitan siiski kontrollida, kas nad pakuvad nende antikehade abil paberile viiteid, ja vaadata paberil olevaid pilte.

Olge ettevaatlik tarnija piltidele usaldades, olen kommertsveebisaitidel näinud ilmselt fotodega ostetud pilte. Kontrollige alati ka viidatud pabereid, sest mõnikord ei kasuta nad tegelikult sama toodet, mida müüakse ...

Minu kogemuse kohaselt on soovitatav rakendus just see: soovitatav. Antikeha võib töötada ka muude rakenduste jaoks. Pange tähele, et näiteks WB, mitte IHC jaoks töötavate antikehade jaoks on olemas põhjendus: näiteks perfusioon fiksaatoritega nagu PFA muudab sihtvalgu 3D struktuuri ja võib maskeerida (või paljastavad) teatud epitopid, nii et antikeha võib olla enam-vähem efektiivne, sõltuvalt sellest, millise valgu vormiga teil on tegemist (natiivne, fikseeritud PFA-s, fikseeritud glutaaraldehüüdis, SDS-denatureerimata jne)

#2
+3
Naofumi Kagami
2011-12-22 07:22:32 UTC
view on stackexchange narkive permalink

WB ja IF antikehadel on epitoobi struktuuri suhtes põhimõtteliselt erinevad nõuded. WB antikehad tunnevad ära SDS-töötlusega pikendatud denatureeritud struktuurid. IF-i antikehad peavad sageli ära tundma omapärase struktuuri.

Olenevalt tarnijast on mõnel IF-i jaoks palju antikehi. Soovitan veel ringi vaadata.



See küsimus ja vastus tõlgiti automaatselt inglise keelest.Algne sisu on saadaval stackexchange-is, mida täname cc by-sa 3.0-litsentsi eest, mille all seda levitatakse.
Loading...